Значение микробиология сельскохозяйственная в медицинских терминах. Сельскохозяйственная микробиология. Роль микроорганизмов в природе и сельскохозяйственном производстве

Шаровидные бактерии, или кокки
Форма шаровидная или овальная.

Микрококки – отдельно расположенные клетки.
Диплококки – располагаются парами.
Стрептококки – клетки округлой или вытянутой формы, составляющие цепочку.
Сарцины – располагаются в виде «пакетов» из 8 и более кокков.
Стафилококки – кокки, расположенные в виде грозди винограда в результате деления в разных плоскостях.
Палочковидные бактерии
Форма палочковидная, концы клетки могут быть заостренными, закругленными, обрубленными, расщепленными, расширенными. Палочки могут быть правильной и неправильной формы, в том числе ветвящиеся, например у актиномицетов.
По характеру расположения клеток в мазках выделяют:
Монобактерии – расположены отдельными клетками.
Диплобактерии – расположены по две клетки.
Стрептобактерии – после деления образуют цепочки клеток.
Палочковидные бактерии могут образовывать споры: бациллы и клостридии.

Извитые бактерии
Форма - изогнутое тело в один или несколько оборотов.
Вибрионы – изогнутость тела не превышает одного оборота.
Спирохеты – изгибы тела в один или несколько оборотов.

Размер бактерий
Микроорганизмы измеряются в микрометрах и нанометрах.
Средние размеры бактерий – 2 – 3 х 0,3 – 0,8 мкм.
Форма и размер - важный диагностический признак.
Способность бактерий изменять свою форму и величину называется полиморфизм

Кафедра биотехнологии, эфиромасличных и лекарственных растений, селекции и семеноводства сельскохозяйственных культур

по СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ МИКРОБИОЛОГИИ И ВИРУСОЛОГИИ

для студентов агрономических специальностей

факультетов ТПХ и ПППВ и ТПХ И ППР

Симферополь

Методические указания подготовлены доцентом Баглаевой Л. Ю.

эфиромасличных и лекарственных растений, селекции и семеноводства сельскохозяйственных культур

факультета ТПХ и ППР для специальности «Агрономия»

Рецензент: доцент ЮФ «КАТУ» НАУ А. В. Ена

Ответственный за выпуск: Бугаенко Л. А.

Работа с терминами – важнейший компонент изучения каждой дисциплины. При изучении любой науки необходимо помнить слова великого ботаника, отца бинарной номенклатуры – Карла Линнея: «Не зная названий теряешь понимание вещей».

Предлагаемый словарь является приложением к технологической карте дисциплины «Сельскохозяйственная микробиология и вирусология» и содержит краткие сведения по наиболее употребляемым терминам данного курса.

Все термины сгруппированы в 7 блоков в соответствии с количеством тем, предлагаемых технологической картой, что облегчает их изучение. Однако, словарь не заменяет учебника, а служит дополнением к нему. Может использоваться для самопроверки знаний.

БЛОК 1

тема: СИСТЕМАТИКА, МОРФОЛОГИЯ И УЛЬТРАСТРУКТУРА МИКРООРГАНИЗМОВ.

Акинеты - специализированные клетки или нити, которые образуют цианобактерии при прохождении жизненного цикла, стадии покоя для переживания неблагоприятных условий.

Актиномицеты или лучистые грибы -(актис - луч, микес - гриб)- порядок распространенных в природе бактерий, совмещающих в себе организацию бактерий и простейших микроскопических грибов. Они характеризуются способностью образовывать мицелий. Цитологически актиномицеты – типичные прокариоты. Относятся к отделу Firmicutes , классу Thallobacteria , порядку Actinomycetales .

Амфитрихи – бактерии, имеющие два пучка жгутиков, расположенных на противоположных полюсах.

Артроспоры – приспособления для вегетативного размножения грибов, результат разлома гиф на отдельные клетки.

Аскоспоры – споры сумчатых грибов – аскомицетов (класс Ascomycetes ), образуются бесполым и половым путем в специальных спорангиях (асках или сумках), отличаются большой устойчивостью.

Бактерии (по гречески бактерион – палочка) - одноклеточные прокариотические организмы, имеющие недифференцированное ядро (нуклеоид), размножаются простым бинарным (поперечным) делением клетки.

Бациллы - палочковидные формы бактерий, способные в неблагоприятных условиях формировать споры.

Бинарное деление – тип размножения бесполым путем, при котором в начале деления клетка удлиняется, затем удваивается нуклеоид, после этого делится вся клетка.

Вакуоли (вакуум - пустота)- пузырьковидные полости в клетках микроорганизмов, наполненные пищеварительными жидкостями с ферментами или продуктами пищеварения, в том числе и газообразными.

Везикулы - вид мезосом в виде пузырьков.

Вибрионы – бактерии-короткие палочки, длиной 1-3 мкм, изогнуты на половину длины волны, напоминают по форме запятую.

Включения - необязательные органоиды. Представлены зернами (гранулами) полисахаридов (гранулезы, гликогена), полифосфата волютина, каплями масла, серы.

Волютин - азотсодержащее с наличием фосфора клеточное включение, близкое к белку и часто наблюдаемое в клетках различных микроорганизмов.

Гетероцисты – специализированные клетки, образуемые цианобактериями при прохождении жизненного цикла, способные усваивать азот из воздуха.

Гифа (гифе - ткань) - микроскопическая, тончайшая, чаще разветвленная и состоящая из одной или многих клеток нить (диаметр 10-50 мкм), из которой построено тело грибов - мицелий.

Гликоген (гликос - сладкий, генос - рождение) - углевод-полисахарид, близкий к крахмалу и широко распространенный в клетках животных и грибов как их основное запасное питательное вещество. Окрашивается раствором Люголя в красно-коричневый цвет.

Гормогонии - специализированные клетки, образованные цианобактериями при прохождении жизненного цикла, служащие для размножения.

Гранулеза (гранулюм - зернышко) - углевод, запасный полисахарид, содержится во многих микробных клетках (в особенности у маслянокислых бактерий) в качестве запасного питательного вещества - клеточного включения (раствором Люголя окрашивается в фиолетовый цвет).

Дипиколиновая кислота - пиридин-2,6-дикарбоновая кислота, обычно отсутствующая у вегетативных клеток бактерий. Может составлять 10-15% массы сухой споры. Накапливается в центральной части споры, образуя с ионами кальция комплекс с повышенным содержанием других катионов, обеспечивает пребывание спор в состоянии покоя и их термоустойчивость.

Диплококки - тип микроколоний при котором после деления клетки располагаются попарно.

Дрожжи (дрожжевые грибы) – это грибы, не образующие мицелия; имеют одноклеточное одноядерное тело.

Кокки (кокос – зерно) – бактерии, характеризующиеся шаровидной формой клеток (величина 0,5-1,0 мкм). Неподвижны, спор не образуют.

Конидии (кониа –пыль, эидос -вид) – споры бесполого размножения у некоторых микроскопических грибов, образующиеся в открытых спорангиях на верхушке особой гифы (конидиеносца).

Консументы - организмы, являющиеся в трофической цепи потребителями органические вещества. Все консументы- гетеротрофы.

Коньюгация – 1). Соматогамия - слияние протопластов двух соматических клеток; 2). Обмен ядерными или цитоплазматическими генами.

Лофотрихи – бактерии, имеющие один пучок жгутиков.

Мезосомы - инвагинации (впячивания внутрь клетки) плазмалеммы, которые выполняют роль всех клеточных мембранных органоидов.

Микоплазмы – группа бактерий, лишенных клеточной стенки и ограниченных только плазматической мембраной. Образуют порядок Mycoplasm а tales , который относится к классуMollicutes , отделу Tenericutes .

Мицелий (грибница ) – вегетативное тело грибов, состоящее из тонких ветвящихся нитей – гиф.

Монотрихи - подвижные бактерии, с одним жгутиком на переднем конце.

Муреин – пептидогликан, опорный полимер клеточной стенки бактерий, имеющий сетчатую структуру и образующий жесткий наружный каркас бактериальной стенки.

Нуклеоид - единственная, чаще кольцевая, хромосома прокариот, выполняющая роль ядра.

Нуклеус – дифференцированное ядро, отделенное от цитоплазмы двумембранной оболочкой..

Окраска по Граму - способ окраски, разработанный датским ученым X. Грамом в 1884 г., позволяющий дифференцировать бактерии. После окраски бактерий генцианвиолетом и обработки их раствором йода клетки одних бактерий обесцвечиваются спиртом (грамотрицательные), клетки других остаются окрашенными в сине-фиолетовый цвет (грамположительные).

Пептидогликан (муреин) - опорный полимер клеточной стенки бактерий, имеющий сетчатую структуру и образующий жесткий наружный каркас бактериальной стенки.

Перитрихи - вся поверхность бактериальной клетки покрыта многочисленными жгутиками.

Пиноцитоз – захват клеточной поверхностью и поглощение клеткой капелек жидкости.

Плазмалемма (цитолемма)- наружная клеточная мембрана толщиной 7-10 нм.

Плектенхима – ложная ткань, образовавшаяся при срастании гифов мицелия. Из плектенхимы строятся плодовые тела и склероции.

Полиморфизм - в одной колонии встречаются микроорганизмы различной формы - кокки, палочки и нити длиной до 10 мкм.

Правило Рубнера гласит: обмен веществ организма пропорционален относительной площади поверхности тела.

Продуценты – автотрофные организмы, создающие с помощью фотосинтеза или хемосинтеза органические вещества из неорганических форм углерода.

Редупликация

Редуценты – организмы, питающиеся мертвым органическим веществом и подвергающие его минерализации (деструкции).

Сарцины (sarcio -тюк) – тип микроколоний у бактерий, клетки делятся в трёх взаимно перпендикулярных плоскостях, образуют пакеты кубовидной формы с числом клеток 8 или 64.

Сегментация – способ размножения актиномицетов. Гифы делятся на сегменты перегородками, в сегментах образуются споры.

Спора – специализированная клетка различного характера и назначения у разных микроорганизмов. Споры грибов служат для размножения, споры бактерий - для перенесения неблагоприятных условий. Обладают повышенной устойчивостью к обезвоживанию, действию высоких температур, радиации и других неблагоприятных факторов, вызывающих гибель вегетативных форм.

Спириллы – один из родов в семействе извитых бактерий, длиной 15-20 мкм, изогнуты на полную длину волны, напоминают растянутую латинскую букву S.

Спирохеты - один из родов в семействе извитых бактерий, тонкие длинные клетки, 20-30 мкм, с большим числом изгибов напоминают растянутую спираль, обладают продольным делением клетки.

Спорообразование – процесс превращения бактериальной клетки в покоящуюся форму – спору. Встречается несколько типов спорообразования:

бациллярный тип - спора образуется внутри клетки и не деформирует ее;

клостридиальный тип - спора образуется в середине клетки, деформируя ее;

плектридиальный тип - спора формируется на конце клетки или за ее пределами.

Стафилококки (staf у l е - гроздь) – тип микроколоний у бактерий; клетки делятся в неопределенных направлениях, образуют скопление клеток, напоминающее виноградные грозди.

Стрептококки (streptos - цепь)- – тип микроколоний у бактерий; клетки делятся в одной плоскости, после деления клетки остаются в цепочках.

Тетракокки - клетки делятся в двух взаимно перпендикулярных плоскостях, образуются группы по 4 клетки.

Тилакоиды –мезосомы пластинчатого типа.

Фагоцитоз (фагеин - пожирать, цитос - клетка) - способность живых клеток (клетки-фагоциты, корненожки и др.) заглатывать и затем переваривать инородные вещества, а также и возбудителей инфекционных заболеваний, что является одним из средств иммунитета.

Хитин (хитон -покров) – азотсодержащее органическое вещество (полисахарид), отличающееся исключительной прочностью и входящее в состав твердых наружных покровов разных животных, а также грибов.

Хламидоспоры – особые споры некоторых грибов, одетые в толстую, часто окрашенную оболочку.

Хроматофоры – 1). Тилакоиды (пластинчатый тип мезосом ), несущие пигменты у бактерий-фотоавтотрофов. 2). Хлоропласты водорослей.

Целлюлоза (клетчатка) – углевод (полисахарид), из которого состоят оболочки растений, отличающиеся большой прочностью. Формула целлюлозы – (С6Н10О5)n.

Цианобактерии - одноклеточные, колониальные, нитчатые организмы, обитают в воде и на суше в сырых местах. Содержат голубовато-зеленый пигмент фикоцианин. Образуют порядок Cyanobacteriales класса Oxyphotobacteria отдела Gracilicutes .

Циста – стадия покоя простейших животных (Protozoa) при неблагоприятных условиях.

БЛОК 2

тема : ОБЩАЯ ФИЗИОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

Автотрофы - организмы, использующие для построения своего тела СО2 в качестве единственного или главного источника углерода и обладающие как системой ферментов для ассимиляции СО2, так и способностью синтезировать все компоненты клетки.

Активный центр фермента – часть молекулы фермента, ответственная за присоединение и превращения субстрата. В одной молекуле фермента может быть несколько активных центров.

Альдолазы – ферменты класса лиаз. Широко распространены у растений, животных, микроорганизмов. Участвуют в процессах анаэробного расщепления углеводов (например, гликолизе). Вызывают разрыв углеродных цепей.

Анаболизм (ассимиляция) – совокупность химических процессов в живом организме, направленных на образование и обновление структурных частей клеток и тканей (совокупность всех реакций синтеза).

Аминоавтотрофы – организмы, использующие минеральные формы азота (NO2-, NO3-, NH3, NH4+, N2). К аминоавтотрофам относятся: дрожжи, плесени, уксуснокислые бактерии.

Аминогетеротрофы – организмы, использующие органические формы азота (белки, аминокислоты, нуклеиновые кислоты, нуклеотиды). К аминогетеротрофам относятся: молочно-кислые бактерии, гнилостные бактерии.

Анаэробы – организмы, способные жить и развиваться при отсутствии в среде молекулярного кислорода.

Апофермент – белковый компонент сложных ферментов. Определяет специфичность действия фермента по отношению к субстрату, проявляет каталитическую активность, при соединении с коферментом.

среде свободного кислорода.

Аэротолерантные – организмы, которые в кислороде не нуждаются, но не погибают при контакте с кислородом (пример – молочнокислые бактерии родов Streptococcus и Lactobacillus ) .

АТФ (аденозинтрифосфат) – нуклеотид, содержащий аденин, рибозу и три остатка фосфорной кислоты; универсальный переносчик и основной аккумулятор химической энергии в живых клетках, выделяющейся в результате окислительного расщепления органических веществ (дыхания, брожения).

Аэробы - организмы, способные жить и развиваться только при наличии в среде свободного кислорода, который ими используется в качестве окислителя.

Биокатализаторы – ферменты или энзимы живых клеток, принимающие участие во всех жизненных проявлениях их.

Брожение - сложный ступенчатый ферментативный анаэробный окислительно-восстановительный процесс распада безазотистых органических веществ (преимущественно углеводов), происходящий при участии микроорганизмов. В этом процессе микробы получают энергию, необходимую для жизнедеятельности.

Гетеротрофы – организмы, использующие в качестве источника углерода готовые органические вещества.

Гидролазы – класс ферментов, катализирующих реакции гидролиза, т. е. расщепления органических соединений с присоединением по месту разрыва элементов молекулы воды (Н+ и ОН‾). В лизосомах живых клеток осуществляют гидролиз полимеров (белков, полисахаридов, нуклеиновых кислот, липидов) до мономеров (аминокислот, сахаров, нуклеотидов, жирных кислот и глицерина). Примеры гидролаз: протеаза, амилаза, липаза, нуклеаза, целлюлаза, целлобиаза.

Гликолиз – ферментативный анаэробный процесс негидролитического распада углеводов (главным образом глюкозы) до пировиноградной кислоты (ПВК). В процессе гликолиза происходит субстратное фосфорилирование. Суммарное уравнение гликолиза:

C 6 H 12 O 6 2 CH 3 COCOOH + 2НАД · Н2 + 2АТФ

Глюкоза пировиноградная

Дегидрогеназы – ферменты класса оксидоредуктаз, катализирующие реакции отщепления водорода от одного субстрата и переносящие его на другой. Участвуют в процессе катаболизма всех типов питательных веществ. Первичные дегидрогеназы : в их состав входят коферменты НАД и НАДФ. Вторичные дегидрогеназы в качестве кофермента могут содержать ФАД и ФМН.

Дыхание – сложный ступенчатый ферментативный процесс расщепления органических веществ до СО2 и Н2О с целью высвобождения всей доступной энергии органических субстратов. Окислителем в процессах дыхания является молекулярный кислород (О2) – аэробное дыхание или связанный кислород нитратов и сульфатов (NO3- или SO42-) – анаэробное дыхание – нитратное или сульфатное.

Изомеразы – класс ферментов, катализирующих внутримолекулярные реакции перестройки органических соединений, в том числе, взаимопревращения изомеров.

Катаболизм – диссимиляция, совокупность ферментативных реакций в живом организме, направленных на расщепление сложных органических веществ – белков, нуклеиновых кислот, жиров, углеродов, поступающих с пищей или запасенных в самом организме.

Кофермент –небелковая часть двухкомпонентного фермента.

Лигазы – синтетазы, класс ферментов, катализирующих реакции присоединения друг к другу двух различных молекул за счет энергии сопряженной реакции гидролиза нуклеозидтрифосфатов (чаще всего АТФ).

Лиазы - класс ферментов, катализирующих реакции негидролитического отщепления от субстратов определенных групп атомов с образованием двойных связей или присоединение отдельных групп или радикалов к двойным связям, что приводит к разрыву углеродных цепей. Так, пируватдекарбоксилаза катализирует отщепление диоксида углерода от пировиноградной кислоты:

СН3СОСООН ® СН3СОН + СО2

пировиноградная уксусный

кислота альдегид

К лиазам относится фермент альдолаза , расщепляющая молекулу фруктозо–1,6–дифосфата (С6) на два С3-соединения.

Микроаэрофилы - микроорганизмы, нуждающиеся в самых малых количествах кислорода для их жизнедеятельности (от долей процента до 10%). Пример – микроорганизмы рода Salmonella .

Микроэлементы - химические элементы, находящиеся в клетках в мельчайших количествах (менее 0,01%), но совершенно необходимые для их жизнедеятельности, служат стимуляторами различных физиологических процессов: цинк, марганец, кобальт, бор, йод и др.

Нитратное дыхание – в процессах диссимиляционной денитрификации нитраты используются в качестве окислителя органических веществ вместо молекулярного кислорода, что обеспечивает микроорганизмы необходимой энергией. Бактерии вида Paracoccus denitrificans окисляют углеводы по уравнению:

C6H12O6 + 4NO3- 6СО2 + 6Н2О + 2N2

Нитрифицирующие бактерии – одноклеточные грамоотрицательные бактерии. Разделяются на две самостоятельные груп­пы: 1) нитрозные бактерии (Nitrosomonas ) - произво­дящие первую стадию нитрификации окисление аммиака до азотистой кислоты, 2) нитратные бактерии (Nitrobacter ) - вызывающие вторую половину процесса - окисление азотистой кислоти в азотную кислоту и ее соли – нитраты.

Облигатные аэробы – организмы, которые сохраняют активность только в присутствии молекулярного кислорода (пример - уксуснокислые бактерии).

Оксидазы – ферменты класса оксидоредуктаз, катализирующие реакции присоединения кислорода. Примеры: пероксидаза, полифенолоксидаза, цитохромоксидаза (фермент а3 ).

Оксидоредуктазы – класс ферментов, катализирующие окислительно-восстановительные реакции. Играют важную роль в обеспечении клеток энергией. Основные представители: первичные и вторичные дегидрогеназы, цитохромы, оксидазы, пероксидазы, оксигеназы.

Органогены - химические элементы, составляющие основу органических веществ: углерод, кислород, водород, азот.

Осмос – односторонне движение веществ через полупроницаемую (т. е. проницаемую только для молекул определенных веществ) мембрану, что лежит в основе поглощения веществ живой клеткой.

Пензофосфатный путь – последовательность ферментативных реакций окисления глюкозо-6-фосфата до СО2 и Н2О, происходящих в цитоплазме живых клеток и сопровождающихся образованием большого количества восстановленного кофермента - НАДФ·Н2.

Сапротрофы – гетеротрофные организмы, использующие для питания готовые органические вещества мертвых тел.

Субстрат – 1).Основа, к которой прикреплены неподвижные организмы (для микроорганизмов и растений одновременно служит и питательной средой). 2).Для ферментов субстрат – вещество, с которым взаимодействует данный фермент, преобразуя его.

Сульфатное дыхание – форма анаэробного дыхания бактерий в условиях недостатка кислорода, когда используется связанный в виде сульфатов кислород. Возбудителями являются бактерии видов Desulfovibrio desulfuricans , Spirillium desulfuricans . Происходит по уранению:

C6 H12 O6 + 3H2 SO4 6CO2 + 6H2 O + 3H2S + E

Сульфофицирующие бактерии – вызывают окисление минеральной серы до сульфатов (сульфофикацию). К ним относятся зелёные серобактерии (род Chlorobium ) и пурпурные (роды Chromatium , Rhodospirillium ), которые используют H2S как источник водорода при фотосинтезе, а также бесцветные серобактерии: Beggiatoa, Thiothrix, Thiospira, которые используют окисление сероводорода в качестве источника энергии.

Трансферазы - класс ферментов, катализирующих обратимый перенос различных групп атомов от молекул одних органических соединений (доноров) к другим (акцепторам). Примеры: ацетилтрансферазы переносят остатки уксусной кислоты CH3CO-, а также молекул жирных кислот, фосфотрансферазы или киназы, обуславливают перенос остатков фосфорной кислоты Н2РО42-. Известны многие другие трансферазы (аминотрансфераза, фосфорилаза).

Факультативные аэробы – организмы, которые могут переключаться с кислородного метаболизма на анаэробный (дрожжи).

Фосфорилирование – включение в молекулу остатка фосфорной кислоты с образованием макроэргической связи. В живых клетках осуществляется ферментами класса трансфераз. Типы фосфорилирования:

- окислительное – синтез молекул АТФ из АДФ и фосфорной кислоты за счет энергии окисления органических веществ; происходит в электронтранспортных цепях;

- фотосинтетическое – фосфорилирование АДФ с образованием АТФ, происходит при фотосинтезе за счет лучистой энергии солнца;

- субстратное - синтез молекул АТФ из АДФ и неорганического фосфата, который происходит при гликолизе за счет перераспределения энергии внутри молекулы.

Фотоавтотрофы – микроорганизмы, которые при синтезе органических веществ из диоксида углерода могут использовать лучистую энергию солнца. В эту группу входят цианобактерии (Nostoc , Anabaena , Gloeocapsa ), окрашенные серобактерии (Chlorobium , Chromatium ) микроскопические водоросли (Ulothrix , Chlorococcum , Closterium ).

Хемоавтотрофы – автотрофные организмы, бактерии, использующие для синтеза органических веществ из диоксида углерода энергию окисления неорганических веществ (Nitrosomonas, Nitrobacter , Thiobacillus ) .

Цикл Кребса – циклическая последовательность ферментативных окислительных превращений три - и дикарбоновых кислот. Суммарное уравнение цикла Кребса:

2 х (СН3СОСООН + 3Н2О 3СО2 + 4НАД Н2 + ФАД Н2 + АТФ)

Цитохромоксидаза (а3 ) – фермент класса оксидоредуказ, катализирует конечный этап переноса электронов на кислород в дыхательной цепи в процессе биологического окисления.

Цитохромы – сложные белки – переносчики электронов, коферментом которых является гем (железопорфирин). Примеры: цитохром в, цитохром с, цитохром а.

Экзоферменты – ферменты, проявляющие свое действие в окружающей клетку среде после их выделения из клетки и называются внеклеточными. Распространенные экзоферменты относятся к классу гидролаз и вызывают распад полимеров на мономеры.

Электротранспортные цепи – последовательность оксидоредуктаз, которые отличаются уровнем окислительной активности. В реакциях дегидрирования в гликолизе и цикле Кребса атомы водорода, отщепляемые специфическими дегидрогеназами, акцептируются коферментами НАД и НАДФ и затем транспортируются в цепи переносчиков. Переносчиками являются флавопротеиды (вторичные дегидрогеназы, коферментами которых являются ФАД и ФМН), цитохромы в, с, а , цитохромоксидаза (фермент а3 ).

Эндоферменты – ферменты, участвующие в метаболизме, находятся всегда внутри образующей их клетки и называются внутриклеточными.

БЛОК 3

тема : ПРЕВРАЩЕНИЯ МИКРООРГАНИЗМАМИ СОЕДИНЕНИЙ УГЛЕРОДА

Амилаза (амилон -крахмал, аза- окончание в названиях ферментов) – фермент класса гидролаз, расщепляющий крахмал до декстринов и мальтозы. Характерен для микроорганизмов, вызывающих маслянокислое брожение сахаров и крахмала (Clostridium pasteurianum ).

Альдолазы - ферменты класса лиаз. Широко распространены у животных, растений и микроорганизмов. Участвуют в процессах анаэробного расщепления углеводов, например, гликолизе, пентозофосфатном расщеплении глюкозы.

Декарбоксилаза - фермент класса лиаз, катализирующий реакции отщепления СО2 от карбоксильной группы аминокислот или α-кетокислот. Например, вызывает декарбоксилирование пировиноградной кислоты и превращение ее в ацетальдегид в процессе спиртового брожения.

Лактаза - фермент, способствующий расщеплению лактозы (т. е. молочного сахара) на глюкозу и галактозу.

Липаза (липос - жир, аза - окончание в названиях фер­ментов) - фермент, расщепляющий в процессе гидролиза жиры на глицерин и жирные кислоты.

Пектиназа (полигалактуроназа) – экзофермент, катализирующий распад пектиновых веществ: разрушающий связи между единицами галактуроновой кислоты, пектина или пектиновой кислоты с образованием небольших цепочек и, в конечном счете, свободной D -галактуроновой кислоты.

Целлюлаза - фермент класса гидролаз; катализирует гидролиз β -1,4-гликозидных связей в целлюлозе с образованием глюкозы или дисахарида целлобиозы. Содержится в проросшем зерне, грибах, вырабатывается многими бактериями, имеется у некоторых животных, питающихся древесиной (корабельный червь, древоточцы). Используется для удаления целлюлозы из пищевых продуктов, а также для превращения целлюлозы в сахар. Выделяемый микрофлорой рубца жвачных, играет большую роль в усвоении травоядными животными целлюлозы.

Целлобиаза – фермент, гидролизирующий дисахарид целлобиозу с образованием глюкозы.

БЛОК 4

тема : ПРЕВРАЩЕНИЯ МИКРООРГАНИЗМАМИ

СОЕДИНЕНИЙ АЗОТА

Азотофиксаторы (азотофиксирующие бактерии или диазотрофы) – микроорганизмы, способные усваивать молекулярный азот и строить из него все разнообразие азотосодержащих органических соединений своей клетки. Эти микроорганизмы свободно живут в почве (Azotobacter chroococcum ) или находятся в симбиозе с растениями (роды Rhizobium и Frankia ) . Обуславливают повышение плодородия почвы.

Аммонификация – процессы разложения органических азотсодержащих веществ с образованием аммиака, протекающие в природе под воздействием микроорганизмов и оказывающие огромное влияние на плодородие почв, т. к. растения не усваивают органические формы азота.

Бактероиды – специализированные активные формы бактерий рода Rhizobium , образующиесяв в клубеньках на корнях бобовых растений. Часто ветвистые или грушевидной формы.

Дезаминирование – отщепление аминогруппы (-NН2) из молекулы органического соединения. Играет важную роль в процессах обмена веществ, в частности в катаболизме аминокислот.

Дезаминазы – ферменты класса лиаз, участвуют в дезаминировании аминокислот и обеспечивают их включение в обмен углеводов.

Денитрификация – процесс восстановления нитратов в нитриты, аммиак и свободный азот, который происходит под воздействием денитрифицирующих бактерий разнообразных видов (например, Paracoccus denitrificans ). Отрицательно влияет на плодородие почвы и проявляется в присутствии углеводов и при недостатке воздуха, высокой влажности и щелочной реакции почвы. Проходит по схеме:

NO3 NO2 NH2OH N2

H2O - H2O - H2O

Диазотрофия – способность некоторых бактерий усваивать молекулярный азот из воздуха (N2). Проходит по схеме:

N = N NH=NH NH2 – NH2 2NH3

АТФ АТФ АТФ

Азот диимид гидразин аммиак

Железобелок - вторая фракция нитрогеназы, содержащая железо. Имеет молекулярную массу 55000 и состоит из двух равных белковых субъединиц. В нее входят сульфидные группы, эта фракция инактивируется кислородом.

Кадаверин – птомаин, токсическое соединение, образующееся в результате анаэробного разрушения белков. Кадаверин получается из лизина:

NH 2 CH 2 (CH 2 ) 3 CHNH 2 COOH NH 2 CH 2 (CH 2 ) 3 CH 2 NH 2 + CO 2

лизин кадаверин диоксид

углерода

Молибдобелок – первая фракция нитрогеназы, содержащая молибден. Препараты этой фракции, выделенные из различных азотфиксирующих микроорганизмов, близки по свойствам, но различаются по молекулярной массе (в пределах 180 000 - 270 000). Состоит из четырех белков, несколько различающихся по молекулярной массе. В молибдобелок входят сульфидные группы и железо. Он инактивируется кислородом.

Нитратредуктаза – фермент класса оксидоредуктаз, при участии молибдена катализирует восстановление нитратов до нитритов. Активность этого фермента зависит от уровня обеспеченности молибденом, а так же от форм азота, применяемых для их питания. При недостатке молибдена в питательной среде резко снижается активность нитратредуктазы.

Нитритредуктаза - фермент класса оксидоредуктаз, при участии молибдена восстанавливает нитриты до аммиака.

Нитрификация - (нитрификацио - обогащение селитрой) - важнейший для плодородия почвы биохимический про­цесс окисления аммиака в соли азотной кислоты (нитраты; или селитры) через промежуточную стадию азотистой кислоты при посредстве нитрифицирующих бактерий (Nitrosomonas, Nitrobacter ) .

Нитрогеназа - фермент, связывающий молекулярный азот. Катализирует восстановление N2 до NH3 в присутствии АТФ (источника энергии) и восстановительных эквивалентов.

Протеазы - (протеин - первое место, аза - окончание в названиях ферментов) - ферменты, производящие гидролиз белковых веществ до аминокислот.

Ризобии – клубеньковые бактерии из рода Rhizobium .

У pea за - фермент, с помощь которого уробактерии производят разложение (дезамидирование) мочевины в углеаммиачную соль с последующим ее распадом на аммиак, углекислый газ и воду.

Блок 5

тема : ВЛИЯНИЕ ВНЕШНИХ УСЛОВИЙ НА

ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТЬ МИКРООРГАНИЗМОВ

Абиоз – (abiosis - отрицание, уничтожение жизни) - достигается физическими и химическими способами. Этот принцип положен в основу горячего консервирования мясных и овощных продуктов (обработка в автоклаве при температуре 120 0С и выше). При высокой температуре погибают вегетативные и споровые формы микробов, прекращаются жизнь и сопутствующие ей процессы, благодаря чему содержимое консервных банок может храниться длительное время. Уничтожить микробы можно химическим путем с помощью антисептиков , безвредных для организма человека. Длительно хранятся продукты после копчения. Термический метод стерилизации консервов более надежен, после него содержащиеся в банке продукты не представляют опасности для здоровья человека.

Автоклавирование - стерилизация насыщенным паром под давлением; является наиболее универсальным и надежным методом стерилизации. Она проводится в автоклавах при давлении 0,5атм. (температура 112 0C) 30-60 минут; при давлении 0,7-1,4 атм. (температура 115-125 0С) - 20 минут. Метод широко используется для стерилизации консервов.

Алкалофилы - развиваются при рН более 8 с максимальным значением 11. К ним относятся уролитические бактерии, обитатели содовых солончаков из рода Bacillus, холерный вибрион.

Анабиоз (anabiosis - задержка жизни) - скрытое состояние жизни, один из основных принципов консервировании растительных и животных продуктов. Во время сушки, маринования, засолки, засахаривания или замораживания жизнедеятельность микробов приостанавливается, процессы, вызываемые ими, задерживаются.

Антибиотики - это специфические химические вещества, образуемые микроорганизмами, а также их производные и синтетические аналоги, обладающие способностью избирательно подавлять микроорганизмы и клетки злокачественных опухолей.

Антисептики - вещества, обладающие противомикробным действием, способные убивать клетки. Используются в медицинской практике, в пищевых производствах и быту. Условно делятся на две группы:

а) антисептики, используемые для обеззараживания (дезинфекции) помещений, оборудования и посуды. Это могут быть любые высокотоксичные вещества: ПАВ, фенолы, окислители, формалин, кислоты, щелочи, спирты, хлорпроизводные и др.;

б) антисептики, используемые для стабилизации пищевых продуктов – консерванты .

Ацидофилы – организмы, которые живут и развиваются при рН < 6, но предельная кислотность не менее 2. К ним относятся молочнокислые и уксуснокислые бактерии, тиобациллы.

Бактериостатическое действие – воздействие неблагоприятных факторов среды (физических, химических и др.), вызывающих задержку роста и размножения бактерий.

Бактерицидное действие - гибель бактериального организма в результате воздействия химических ядовитых веществ, которые, взаимодействуя с составными ее компонентами, нарушают функции клетки.

Баротолерантность - способность микроорганизмов переносить высокое гидростатическое давление (например, Pseudomonas fluorescens).

Барофильность. Н екоторые микроорганизмы морских глубин и нефтяных пластов не способны расти при нормальном давлении. Они нуждаются в высоком давлении и называются барофильными (например, Vibrio marinus )

Биоз - (bios - жизнь) . Один из основных принципов хранения продуктов сельского хозяйства в живом состоянии, но с поддержанием в них жизнедеятельности на низком уровне.

Галофилы - организмы, развивающиеся при солености, превышающей соленость морской воды называются галофильными. Примером таких микробов является род Halobacterium .

Замораживание – хранение при отрицательных температурах. Температура промышленных и бытовых морозильных камер должна быть не выше – 15ºС.

Излучения - испускание и распространение энергии в виде волн и частиц.

Ингибиторы – вещества, которые задерживают течение биологических процессов, подавляя каталитическую активность отдельных ферментов или ферментных систем.

Лиофильная сушка (сублимация) –высушивание в вакууме из замороженного до –760 С состояния. Этот метод используется для консервации микробных культур, сыворотки, вакцин, лекарственных препаратов.

Мезофилы – микроорганизмы, которые имеют оптимум, близкий к температуре тела теплокровных животных. Максимальная температура близка к 550С. К этой категории относятся бактерии кишечной группы, например, Escherichia coli .

Осмофильность – способность микроорганизмов предпочтительно расти при повышенном осмотическом давлении, которое вызывают органические вещества, чаще всего сахара. К осмофильным микробам относятся грибы рода Xeromyces .

Осмотолерантность – устойчивость микроорганизмов к высоким концентрациям осмотически активных веществ. Осмотолерантными организмами являются дрожжи из рода Zygosaccharomyces , разлагающие мед.

Охлаждение – хранение продукции при низких положительных температурах (+2 - +3ºС). Температура должна быть выше точки замерзания клеточного сока. Предназначено для хранения плодов и овощей.

Пастеризация - метод частичной стерилизации при невысоких температурах (60-70ºС), применяется для разделения спороносных и бесспоровых бактерий, а также для недолгосрочного предохранения от порчи некоторых продуктов (молока, фруктовых соков).

Пирофилы (гипертермофилы) – микроорганизмы, способные существовать при температурах от 100ºС и выше(например, Sulfolobus acidocaldarius ).

Психрофилы – микроорганизмы, которые развиваются при низких температурах в диапазоне от -8 (-10) до +20ºС. Встречаются в северных морях, в ледниках, в холодильных камерах (например, Fusarium nivale ) .

Плазмолиз - сжатие цитоплазмы с отставанием ее от оболочки под влиянием потери воды у клеток микроорганизмов и растений при погружении их в растворы с повышенной концентрацией солей, сахара, глицерина.

Стерилизация (sterilis – бесплодный) - обеспложивание, т. e. полное уничтожение микроорганизмов и всего живого в стерилизуемых объектах. Достигается воздействием высоких температур, жестким излучением, химическими ядовитыми веществами.

Термофилы – теплолюбивые микроорганизмы, растущие в диапазоне температуры от +40ºС до +700С. Представителем термофилов является Clostridium thermocellum .

Холодная стерилизация – прием обеззараживания вина в аппаратах-актинаторах, где используется комплексное облучение ультрафиолетовыми и инфракрасными лучами либо ультрафиолетом в сочетании с ультразвуком.

Ценоанабиоз - один из основных принципов консервирования, продуктов, преимущественно растительных, в основе которого лежит противодействие одних видов микробов жизнедеятельности других видов. Консервирующее вещество (молочную кислоту) вырабатывают сами микроорганизмы при силосовании, квашении и других способах приготовления кормов и овощей.

БЛОК 6

тема : СПЕЦИАЛЬНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

Автохтонная (аборигенная) микрофлора - постоянно присутствующая в почве - в неудобренной, неокультуренной. Участвует в процессах образования гумуса и его разложения (представители – роды Mycobacterium, Azotobacter, Micromyces).

Азотобактерин (или азотоген) - бактериальный эемлеудобрительный препарат, содержащий в себе чистую культуру азотобактера и применяемый при посеве семян зерновых культур и при посадке рассады овощных растений. Является экологически чистым азотным удобрением, оптимизирует минеральное питание растений.

Антагонизм – форма отрицательных биологических связей, подавление жизнедеятельности одного организма другим. Встречается несколько видов антагонизма:

а) пассивный (конкурентный) антагонизм - взаимодействие, при котором разные микроорганизмы используют одни и те же пищевые субстраты. Преимущество получают быстрорастущие и размножающиеся виды;

б) активный антагонизм - обусловлен выделением бактерицидных веществ - продуктов обмена. Например, молочнокислые бактерии, выделяя молочную кислоту в качестве основного продукта брожения тем самым угнетают гнилостные бактерии.

Антибиоз - форма отрицательных биологических связей, подавление жизнедеятельности других организмов путем выделения специфических веществ - антибиотиков.

Антибиотики - это специфические химические вещества, образуемые микроорганизмами, а также их производные и синтетические аналоги, обладающие способностью избирательно подавлять микроорганизмы и клетки злокачественных опухолей. Сильными продуцентами антибиотиков являются мицелиальные грибы, актиномицеты, некоторые бактерии.

Зимогенная микрофлора - микроорганизмы, обладающие способностью продуцировать мощные гидролитические ферменты и появляющиеся в почве при поступлении больших количеств свежего органического вещества, осуществляют грубое его разложение (примеры: сахаролитики: Saccharomyces , Rhodotorula , Streptomyces , Cryptococcus , Clostridium ; целлюлозоразрушители: С ytophaga , Aspergillus , Cellvibrio , Penicillium ; аммонификаторы: Bacillus , Proteus ). Комменсализм – форма симбиоза. Сосуществование двух организмов, в котором пользу извлекает только один партнер, не нанося вреда другому. К комменсалам относится саптротрофная микрофлора слизистых оболочек и кожи, эпифитная микрофлора растений.

Мезосапробная зона – зона умеренного загрязнения воды. Содержание органического вещества небольшое. Происходят интенсивно процессы окисления и нитрификации.

Метабиоз - это форма межвидовых отношений, при которой продукты метаболизма одного вида микроорганизмов являются пищевым или энергетическим субстратом для другого вида. Такие взаимоотношения характерны для нитрифицирующих бактерий (Nitrosomonas, Nitrobacter ) : продукт жизнедеятельности нитрификаторов первой фазы - азотистая кислота - служит энергетическим субстратом для возбудителей второй фазы.

Микориза (грибокорень). Корни большинства высших растений инфицированы грибами. В результате строение корня растения изменяется: образуется симбиотическая структура, которая называется микориза (грибокорень). Растения, образующие микоризу, получают преимущество в минеральном питании: они поглощают значительно больше воды и питательных веществ, чем растения без микоризы.

Мутуализм – форма положительных биологических связей, взаимовыгодное сосуществование двух организмов без облигатности. Оба партнера могут существовать по отдельности, однако в симбиозе они увеличивают продуктивность друг друга (пример: бобовые растения и клубеньковые бактерии).

Микробная оценка воды производится по следующим показателям:

Микробное число - количество колоний, выросших в чашках Петри на мясопептонном агаре (МПА) из 1 мл водопроводной или артезианской воды при температуре 37°С в течение 24 ч. Микробное число питьевой (водопроводной) воды должно быть не более 100.

Коли - титр - наименьший объем воды в миллилитрах, в котором обнаруживается одна кишечная палочка. Коли-титр питьевой (водопроводной) воды должен быть не менее 300.

Коли - индекс - количество кишечных палочек в 1 л воды. В водопроводной воде он не должен превышать 3.

Облигатный (классический) симбиоз – форма межвидовых отношений. Сосуществование двух организмов, которые в определенных условиях не могут обходиться друг без друга. Примером являются комплексные симбиотические организмы - лишайники, в составе которых водоросль (автотрофный компонент) и грибница (гетеротрофный компонент) в определенных жестких условиях обитания друг без друга существовать не могут.

Олиготрофная микрофлора - микроорганизмы, которые способны усваивать мизерные количества органического вещества, завершающие процесс минерализации в почве. Чаще имеют экзотическую морфологию (почкующиеся бактерии, стебельковые бактерии).

Олигосапробная зона – зона слабого загрязнения воды. Микробы немногочисленны: в 1 мл воды содержатся десятки или сотни микробных клеток; кишечная палочка отсутствует. Органические вещества минерализованы; самоочищение воды закончилось или находится в стадии завершения.

б) генетический характерен для вирусов и бактериофагов, а также риккетсий, способных использовать генетический аппарат клетки-хозяина для получения всех необходимых метаболитов.

Полисапробная зона - зона сильнейшего загрязнения воды. Вода здесь богата растительными и животными остатками, содержит белки, клетчатку, пектиновые вещества, гликоген и т. д. Характеризуется развитием микробных процессов анаэробного типа - брожения и аммонификации белковых веществ. В такой среде быстро поглощается кислород.

Ризотрофин – землеудобрительный препарат клубеньковых бактерий рода Rhizobium . Основа - стерилизованный Υ-облучением низинный торф, к которому добавлены питательные вещества для клубеньковых бактерий. Вносится при посеве бобовых культур вместе с семенами.

Сапробность – показатель о бсеменения воды микробами.

Сенаж – корм высокого качества, получающийся при участии молочнокислых бактерий. Влажность консервируемой массы 50-65% - значительно ниже нормальной влажности (75%).

Фитонциды - выделяемые растениями при их жизни особые вещества, разнообразные по химической природе, но обладающие общим свойством губительного действия на микроорганизмы и поэтому относящиеся к числу антибиотиков . Антибиотики, получаемые из растений:

-аллицин – антибиотик, образуемый растениями чеснока;

-аренарин - антибиотик, образующийся из бессмертника;

-иманин - антибиотик, получаемый из зверобоя.

Хищничество - это удовлетворение своих пищевых потребностей за счет организма – жертвы при ее умерщвлении. К хищникам относятся многие инфузории и гриб-хищник Dactуlaria , который имеет приспособления для ловли почвенных нематод.

Целлюлозоразрушители – разнообразные микроорганизмы, вызывающие разложение клетчатки, способны образовывать гидролитический фермент целлюлазу. Анаэробные: сбраживают клетчатку с образованием органических кислот и водорода (Clostridium omelianskii). Аэробные оксиляют клетчатку до конечных продуктов - CO2 и H2O (Cytophaga hutchinsonii , Cellvibrio ochracea ) .

Эпифитная микрофлора – это микроорганизмы, обитающие на поверхности растительных макроорганизмов, не проникая в их ткани. Примеры эпифитных микроорганизмов: бактерии : Pseudomonas herbicola , Flavobacterium , Sarcina (55 видов), дрожжи: Cryptococcus , Rhodotorula , мицелиальные грибы: Cladosporium , Alternaria , Botrytis , Fusarium .

БЛОК 7

ВИРУСОЛОГИЯ

Абсорбция - закрепление бактериофага на стенке бактерии с помощью шипов и щупалец базальной пластины.

Агглютинация (agglutinare – склеивать) – склеивание и выпадение в осадок из однородной взвеси микроорганизмов, эритроцитов и др. клеток. Происходит в результате взаимодействия антител и антигенов. Одна из наиболее употребительных серологических реакций для выявления соответствующих антител в сыворотке, определения групп крови и идентификации микроорганизмов.

Антигены – сложные органические вещества, которые воспринимаются организмом как чужеродные. При поступлении в организм животных могут вызвать ответную иммунную реакцию в виде образования антител.

Антитела - защитные вещества белковой природы, образующиеся в живом организме и накопляющиеся в сыворотке крови под влиянием введения в организм антигенов. Составляют основу иммунитета и характеризуются строгой специфичностью взаимодействия с вызвавшим их образование антигеном.

Бактериофаг – вирус бактерий, обладающий способностью растворять (лидировать) живые бактерии, неви­димый при обычном микроскопическом исследовании и широко распространенный в природе (почва, вода, к:ишечник живот­ных и людей):

- умеренный – данные фаги в жизненном цикле проходят три первых этапа (абсорбция, инъекция, встраивание в нуклеоид), а затем реплицируются синхронно с хромосомой бактерии. При размножении бактерии инфекционное начало переходит в дочерние клетки.

- вирулентный - фаг, способный растворять (лизировать) бактерии под влиянием условий внешней среды (УФ, рентгеновское излучение).

Вирион - внеклеточная форма вируса, инертная инфекционная частица, которая состоит из нуклеиновой кислоты и белковой оболочки-капсида.

Вироиды – это мельчайшие из известных возбудителей болезней; они много меньше самых малых вирусных геномов и лишены белковой оболочки. Известны только вироиды растений; они состоят из однонитевой молекулы РНК, которая автономно реплицируется в зараженных клетках.

Иммунологический метод - любой вирус, будь то вирус растений, животных или бактерий, при введении кроликам или другим мелким млекопитающим ведет себя как эффективный антиген. В результате образуются специфические антитела, которые реагируют с антигенами (вирусами) и используются для их обнаружения.

Индикаторные растения - это такие растения, которые реагируют характерными симптомами на заражение вирусом.

Инокуляция – заражение вирусом растений (инокуляция соком).

Инъекция - впрыскивание фаговой ДНК внутрь бактериальной клетки.

Капсид - белковая оболочка вируса, состоит из белковых субъединиц – капсомеров.

Капсомер - белковые субъединица капсида.

Лизогения - форма существования умеренного бактериофага в клетке бактерии. Фаговая ДНК встраивается в хромосому клетки-хозяина и реплицируется синхронно с ней. Вирусные свойства фага не проявляются.

Преципитация (от лат. praecipitacio - падение вниз, осаждение) - реакция, позволяющая осадить вирусы (антигены) с помощью антител, обладает высокой чувствительностью и специфичностью.

Полиэдрический капсид – форма капсида с кубическим типом симметрии.

Репликация – процесс самовоспроизведения макромолекул нуклеиновых кислот, обеспечивающий точное копирование генетической информации и передачу ее от поколения к поколению.

Ретровирус – семейство РНК содержащих вирусов. Диаметр вирусных частиц 70-120 нм. Капсид икосаэдрический, заключен в липопротеидную оболочку. Для них характерен РНК-зависимый синтез ДНК (обратная транскрипция).

Типы вирусных симптомов:

1)Мозаика - неравномерная зеленая окраска листовой пластинки или наличия пятен желтоватого или светло-зеленого цвета.

2)Хлороз - общее или симметричное пожелтение тканей листа.

3)Некроз - отмирание тканей растений, часто является следствием мозаики или хлороза при сильном их развитии, нонередко развивается и самостоятельно. Выделяют местный некроз - развивается в местах проникновения инфекции растение и системный (рассеянный) некроз - может проявлять на любых частях растения.

4)Деформации органов растений разнообразны и могут быть вызваны физиологическими нарушениями, которые привели к изменению морфологии органов или всего растения. В результате нарушения координации роста развивается морщинистость, курчавость, вздутия, искривления побегов.

5)Угнетение роста может выражаться в общей карликовое растений, укорочении междоузлий на верхушке побега.

6)Увядание наблюдается при сильном поражении сосудистой системы.

7)Израстание (пролиферация). Непосредственными причинами израстания может быть нарушение покоя пазушных и зимующих почек или перерождение и вегетативный рост генеративных органов.

8)Абортивность - опадение цветков и завязавшихся плодов или отдельных семян в плоде, бессемянность плодов.

9)Новообразования - опухоли на различных частях растения (например, разрастание жилок листа), листовидные выросты энации и др.

10)Антоцианоз - пурпурное, красно-фиолетовое или сине-фиолетовое окрашивание листьев или их краев, жилок, стеблей.

11)Пестролепестность - неравномерность окраски и частичное обесцвечивание лепестков.

Трансдукция – перенос генетической информации бактериофагом из одной бактериальной клетки в другую.

Электрофорез - перемещение заряженных частиц в электрическом поле. Используется для разделения смеси белков, пептидов, вирусов и др.

Подписано к печати «_________» 2006г.

Формат 60х1/16, объем 1,2 п. л.

Заказ №__________. Тираж 300 экз. Отпечатано в ЮФ «КАТУ» НАУ

Г. Симферополь / Исполнитель – М. С.Васецкая